FITC-Human Transferrin这个产品,其实就是给人转铁蛋白做了个FITC标记。转铁蛋白是血浆里的铁运输工具,它的结构里有好几个赖氨酸残基,正好能跟FITC里的异硫氰酸酯基团结合。这两种物质通过共价键连在一起,就变成了一种带绿色荧光的复合物。这样既不影响它原来结合铁的能力,也让它有了荧光特性,方便用显微镜或者流式细胞仪看。这个复合物的分子量比没标记的转铁蛋白稍微大一点,不过生物活性还是好好的,照样能跟细胞表面的TfR受体高亲和力结合,然后让细胞把它吞进去。合成的时候得小心点,不能破坏转铁蛋白的天然形状。先把FITC溶解在DMSO或者碳酸氢钠缓冲液里,把转铁蛋白溶在PBS里。调节一下两者的比例,让FITC稍微多一点,这样标记效率更高。然后放在避光的室温环境下反应就行。反应过程里,FITC的基团会去找转铁蛋白的赖氨酸上的伯胺基团反应,形成稳定的硫脲键。反应完了以后,用透析或者凝胶过滤的办法把没用掉的FITC洗掉。再把产物换到生理用的缓冲液里就行了。最后做个SDS-PAGE电泳看看分子量变没变,还要做个受体结合实验确认它和TfR还能不能好好互动。这个产品在研究里用处可大了。作为模型配体,它能让我们实时看到转铁蛋白从细胞膜结合到进入内体的全过程。在研究铁代谢的时候,还能追踪铁离子在细胞里的流动路径。因为肿瘤细胞表面的TfR表达量高,所以它也可以当靶向探针去识别肿瘤细胞。在药物递送这块儿,它还能做纳米载体的表面修饰配体。新维创生物有卖这个化学试剂的,生产的时候都挺规范的。不过要提醒一下,这个东西只能用在科学研究上,不能随便拿去做人体实验或者临床治疗。