science of proteomics:dev 病毒的感染机制

在这次实验中,研究者们决定用互作蛋白质组学来探究鸭肠炎病毒(DEV)是如何感染并致病的。他们将AR1蛋白和C-mRFP结合,给病毒糖蛋白GC的末端融合上标签,成功构建了荧光标记的rgCRFP。为了找出与GC相互作用的宿主蛋白,他们把gC-mRFP当作探针,先对感染了rgCRFP的鸡胚胎成纤维细胞(CEF)进行了蛋白裂解。接着用商业抗RFP抗体把这些蛋白进行免疫共沉淀(Co-IP),然后通过质谱分析从中找出了14284个多肽和2800个蛋白质。为了验证这些发现,他们采用了膜结合裂解泛素酵母双杂交系统(MbYTH)和双分子荧光互补(BIFC)技术。结果显示,在21种被确认的宿主蛋白里,有7种蛋白(GNG2、AR1H1、PPP2CA、UBE2I、MCM5、NUBP1和HN1)确实能和GC发生相互作用。通过这样的研究,大家对DEV病毒的感染机制有了更深入的了解。这项研究发表在《Journal of Proteomics》上,影响因子为4.0638,文章的DOI是10.1016/j.jprot.2021.104281,作者团队包括Chen、Ni和Hua等人。